PAN Olsztyn

Przygotowanie materiału do badań:

• Izolacja komórek: ciałka żółtego, myometrium, endometrium, nabłonka jajowodu

• Hodowle komórek i skrawków: inkubator (Memmert, Niemcy)

Metody analityczne i pomiarowe:

• Ocena przeżywalności komórek (test cytotoksyczności): czytnik ELISA (Multiscan EX, Labsystems, Finlandia)

• Enzymoimmunologiczne oznaczanie hormonów steroidowych, białkowych i prostaglandyn (czytnik ELISA, Multiscan EX,Labsystems)

• Klasyczna technika PCR i jej modyfikacje: RT-PCR, nested-PCR, touchdown PCR (system dokumentacji żeli MiniBIS Pro)

• Pomiar zmian ekspresji genów metodą RT PCR i Real-time PCR:

• izolacja RNA, (spektrofotometr BioPhotometr, Eppendorf, oraz spektrofotometr Nonodrop)

  • odwrotna transkrypcja, PCR (termocykler MJ Mini BioRad)

  • system detekcji dla Real-time PCR (APB Prism 7300 Applied Biosystems, USA)

  • system do analizy obrazu MiniBIS Pro (DNR Bio Imaging System, Israel)

• 5’ i 3’ RACE PCR - szybka amplifikacja końców cDNA

• Pomiar ilości białka metodą Western Blot: Mini PROTEAN 3 System (system dokumentacji żeli MiniBIS Pro).

• Pomiar mobilizacji wewnątrzkomórkowych jonów Ca2+ z wykorzystaniem barwnika fluorescencyjnego Fura 2 (mikroskop Nikon Eclipse TS 100 z oprogramowaniem do analizy NIS-Elements Basic Research),

• Immunohistochemia (kriostat, analiza obrazu – mikroskop Imager Z1-Zeiss z oprogramowaniem Axio Vision 4.8).

• Pomiar aktywności motorycznej (kurczliwości) skrawków myometrium i jajowodu: tensometr (Hugo Sachs Elektronik, Niemcy – urządzenie na stanie ZLRF)

• Oznaczanie katecholamin metodą HPLC z detekcją elektrochemiczną (Hewlett-Packard, Series 1050)